人ELISA檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)操作程序檢驗(yàn)結(jié)果
　　
　　人ELISA檢測(cè)試劑盒樣本要求
　　
　　人ELISA檢測(cè)試劑盒樣本類(lèi)型和采集
　　
　　以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過(guò)程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。
　　
　　1、細(xì)胞培養(yǎng)上清：4000rpm條件下離心20min，去除細(xì)胞顆粒和聚合物，上清液保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。
　　
　　2、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，4000rpm條件下離心20min，小心地分離出血清，保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。
　　
　　3、血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在4000rpm條件下，離心20分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。
　　
　　人ELISA檢測(cè)試劑盒操作程序
　　
　　1、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫，標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品，建議做復(fù)孔。
　　
　　2、按前面試劑準(zhǔn)備中描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。
　　
　　3、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。
　　
　　4、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL，樣本孔加待測(cè)樣本50μL，空白孔不加。
　　
　　5、除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL。
　　
　　6、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
　　
　　7、揭開(kāi)封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置20s，甩去洗滌液，吸水紙上拍干。
　　
　　8、如此重復(fù)4次（共洗板5次）。若使用自動(dòng)洗板機(jī)，請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板。
　　
　　9、將底物A和B按1:1體積充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min。
　　
　　10、所有孔加入終止液50μL，在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度（OD值）。